RNAclean Kit

A-1 Hüceyrə lizisi və ya homogenləşməsi kifayət deyil

---- Nümunə istifadəsini azaldın, lizis tamponunun miqdarını artırın, homogenləşməni və lizis müddətini artırın.

A-2 Nümunə miqdarı çox böyükdür

---- İstifadə olunan nümunə miqdarını azaldın və ya lizis tamponunu artırın.

A-1 Yetərsiz hüceyrə lizisi və ya homogenləşmə

---- Nümunə istifadəsini azaldın, lizis tamponunun miqdarını artırın, homogenləşməni və lizis müddətini artırın.

A-2 Nümunə miqdarı çox böyükdür

---- Zəhmət olmasa maksimum emal tutumuna müraciət edin.

A-3 RNT sütundan tamamilə ayrılmır

---- RNazsız su əlavə etdikdən sonra santrifüjdən əvvəl bir neçə dəqiqə saxlayın.

A-4 etanol elüentdə

---- Duruladıqdan sonra yenidən santrifüj edin və yuyucu tamponu mümkün qədər çıxarın.

A-5 Hüceyrə mədəniyyət ortamı tamamilə çıxarılmır

---- Hüceyrələri toplayarkən, mədəniyyət mühitini mümkün qədər çıxardığınızdan əmin olun.

A-6 RNAstore-da saxlanılan hüceyrələr effektiv şəkildə santrifüj edilmir

---- RNAstore sıxlığı orta hüceyrə mədəniyyət mühitindən daha böyükdür; buna görə mərkəzdənqaçma qüvvəsi artırılmalıdır. 3000x g -də santrifüj etmək tövsiyə olunur.

A-7 Nümunədə aşağı RNT tərkibi və bolluq

---- Aşağı məhsuldarlığın nümunədən qaynaqlandığını müəyyən etmək üçün müsbət nümunə istifadə edin.

A-1 Material təzə deyil

---- Təzə toxumalar dərhal maye azotda saxlanmalı və ya çıxarılma effektini təmin etmək üçün dərhal RNAstore reagentinə qoyulmalıdır.

A-2 Nümunə miqdarı çox böyükdür

---- Nümunə miqdarını azaldın.

A-3 RNase çirklənməsin

---- Kitdə təqdim olunan tamponda RNaz olmasa da, ekstraksiya prosesində RNazı çirkləndirmək asandır və ehtiyatla işlənməlidir.

A-4 Elektroforez çirklənməsi

---- Elektroforez tamponunu dəyişdirin və istehlak materiallarının və Yükləmə Tamponunun RNaz çirklənməməsindən əmin olun.

A-5 Elektroforez üçün çox yüklənmə

---- Nümunə yükləmə miqdarını azaldın, hər quyunun yüklənməsi 2 μg-dən artıq olmamalıdır.

A-1 Nümunə miqdarı çox böyükdür

---- Nümunə miqdarını azaldın.

A-2 Bəzi nümunələr yüksək DNT tərkibinə malikdir və DNase ilə müalicə edilə bilər.

---- Alınan RNT həllinə RNazsız DNaz müalicəsi aparın və RNT müalicədən sonra sonrakı təcrübələr üçün birbaşa istifadə edilə bilər və ya RNT təmizləmə dəstləri ilə daha da təmizlənə bilər.

150 ° C -də 4 saat bişmiş şüşə məmulatlar üçün. Plastik qablar üçün 0,5 M NaOH-a 10 dəqiqə batırılır, sonra RNazsız su ilə yaxşıca yuyulur və sonra RNazı tamamilə çıxarmaq üçün sterilizasiya edilir. Təcrübədə istifadə edilən reaktivlər və ya məhlullar, xüsusən də su, RNazdan azad olmalıdır. Bütün reagent preparatları üçün RNazsız su istifadə edin (təmiz bir şüşə şüşəyə su əlavə edin, 0.1% (V/V) son konsentrasiyasına DEPC əlavə edin, bir gecədə silkələyin və avtoklav edin).